- 1
- 2
歐洲進口工業(yè)設(shè)備
五金工具建材
機械
泵閥儀表
儀器儀表
模擬盒藥物測試安全表校準器組合式測試設(shè)備控制系統(tǒng)硬度計熱交換器掃描器沾污儀紫光源混合器萬用表百分表風速儀分度盤放大器六分儀熱像儀拐檔表數(shù)顯表檢測儀木材測濕儀電子秤靜電消除器真空計壓力表進樣器移液器剩磁探測測試儀擺動缸濾芯測力計打標機試驗機混合機平衡器溫控器壓力氣壓張力能量計報警器測距儀定位器熒光儀編碼器注射器打印機液位計折光儀流量計感應(yīng)機探測器檢測器超聲波發(fā)生器濕度計傳感器聯(lián)軸器烘烤設(shè)備檢漏儀制冷機輻射測溫傳輸探頭光譜儀射線干燥器發(fā)射器指南針印刷設(shè)備操作面板顯示器粘度計量塊調(diào)節(jié)器采樣記錄儀油位計料位計冷卻分析溫度計壓差測量發(fā)生器電子電工
壓力開關(guān)
實驗室設(shè)備
| 使用presens的pH傳感器在微流控芯片中測量細胞的PH值 |
| 點擊次數(shù)：775 更新時間：2025-09-30 |
微流控生物反應(yīng)器內(nèi)的真菌代謝物篩選
作為無柄生物，植物不能輕易通過搬遷來規(guī)避壓力源。為了評估所經(jīng)歷的非生物和生物脅迫的質(zhì)量和數(shù)量，植物已經(jīng)進化出復(fù)雜的信號通路。通常，屬于潛在病原體的分子是在植物質(zhì)膜的水平上被識別出來的。識別后，信號從細胞外部傳遞到細胞中，最終誘導(dǎo)防御反應(yīng)（如果可能的話）。在病原體觸發(fā)免疫 （PTI） 中，一種基礎(chǔ)防御反應(yīng)，信號通常在二級信使 Ca 的幫助下傳遞2+.細胞外間隙含有相對高濃度的 Ca2+，尤其是與細胞質(zhì)中的濃度并列時。為了對病原體的存在做出反應(yīng)，Ca2+離子被轉(zhuǎn)運到細胞中，在轉(zhuǎn)錄因子的幫助下改變細胞的行為。這個 Ca 的導(dǎo)入2+與 H 跨質(zhì)膜的轉(zhuǎn)運一起發(fā)生。質(zhì)子的轉(zhuǎn)運導(dǎo)致細胞外 pH 值的變化，這很容易量化。pH 值變化是評估植物是否發(fā)生 PTI 反應(yīng)的常用讀數(shù)。 為了快速連續(xù)篩選多種真菌代謝物的免疫活性，需要一個簡單可靠的系統(tǒng)來測量微流體生物反應(yīng)器 （MBR） 中的 pH 值變化，該系統(tǒng)由 KIT 微結(jié)構(gòu)技術(shù)研究所 （IMT） 與 KIT 植物研究所合作開發(fā)。因此，設(shè)計了一個從 PreSens pH-1 SMA HP5 到 MBR 中相應(yīng)傳感器點 SP-HP5 的可伸縮但可密封的連接器，并在機械和生物實驗中進行了檢查。MBR 是一種用于培養(yǎng)植物細胞的雙室生物反應(yīng)器（見圖 1A）。透膜將培養(yǎng)室和營養(yǎng)流室隔開。它最初是由 IMT 的 Tim Finkbeiner 設(shè)計的，然后進一步發(fā)展。細胞可以通過橢圓形腔室兩端的兩個開口帶入培養(yǎng)室。開口配有 M5 螺紋，以便用合適的螺釘密封。MBR 可以通過單向流連接到更多的 MBR。因此，留在培養(yǎng)室中的細胞持續(xù)獲得來自先前 MBR 的新鮮培養(yǎng)基和代謝產(chǎn)物，同時它們自身的代謝產(chǎn)物被運輸?shù)较乱粋€ MBR 并帶走廢物。基本原理是剖析細胞間通訊通路，通過每個 MBR 培養(yǎng)一種細胞來獲取有關(guān)所涉及的過程和反應(yīng)的信息。在 MBR 的培養(yǎng)室中培養(yǎng) Nicotiana tabacum 的 BY2 系細胞時，通過 pH-1 SMA HP5 定量 pH 值?？梢詫⒁u估免疫活性的物質(zhì)添加到供應(yīng)給細胞的培養(yǎng)基中。如果可以觀察到 pH 值的增加，則可以將其解釋為目標物質(zhì)免疫活性的第一個跡象。
圖 1：微流控生物反應(yīng)器 （MBR）：A） MBR 的頂視圖和側(cè)視圖示意圖。它由兩個腔室組成，由半透膜隔開，僅允許介質(zhì)和溶劑通過。B） MBR 和傳感器的設(shè)置：傳感器點 SP-HP5 通過一個連接器安裝，該連接器擰入培養(yǎng)室兩個螺紋開口的右側(cè)（在這種情況下，第二個開口覆蓋有 851 型 3M 聚酯膠帶）。傳感器點通過玻璃纖維連接到測量設(shè)備 pH-1 SMA HP5 上。
結(jié)論 從我們的實驗結(jié)果和不同的設(shè)計中，我們得出結(jié)論，通過不同連接器設(shè)計的透光率似乎并沒有顯著影響測量。然而，與通過玻璃燒杯進行的參考測量相比，聚合物連接器測得的 pH 值似乎發(fā)生了變化。由于玻璃是傳感器指南中規(guī)定的適當反應(yīng)器材料，因此可能需要進行特殊校準來應(yīng)對玻璃中的光折射，這會導(dǎo)致使用聚合物時測量值發(fā)生變化。如果這種變化可以得到驗證 - 可能通過更多和不同的設(shè)置測試 - 并且考慮到 pH-1 SMA HP5 傳感器的相應(yīng)位置將適合測量我們 MBR 中的 pH 值。 在之前的實驗中，我們通過使用使用電極的臺式 pH 計測量 pH 值，證實了 25 μg/mL 殼聚糖會導(dǎo)致 BY2 細胞中細胞外 pH 值升高。使用相同的處理，這項工作旨在證明 MBR 和 pH-1 SMA HP5 系統(tǒng)的組合可用于觀察與免疫反應(yīng)相關(guān)的細胞外 pH 值增加。開始處理后，15 分鐘后觀察到 pH 值顯著升高。這種延遲可以通過處理后的 MS 需要泵入 MBR 的時間來解釋。觀察到的 pH 值變化表明該方法可用于篩選植物細胞上物質(zhì)的免疫活性。通過使用多個通道和傳感器點，將有可能建立高通量 篩選方法。此外，我們研究了由于腔室的橢圓形，MBR 培養(yǎng)室中營養(yǎng)梯度的發(fā)展。關(guān)于此評估，在更大區(qū)域（例如，使用 VisiSens 系統(tǒng)）中分析 pH 值將很有趣。然而，傳感器箔必須打孔，營養(yǎng)流才能到達培養(yǎng)室，并且必須建立傳感器箔的安裝過程。
|
18804209403
首 頁